周公解梦梦见洗头精品文档2016 全新精品资料-全新公文范文-全程指导写作 –独家原创 生物技术本科毕业论文综述生物能源研究与开发广西高校重点实验室实行式管理, 每天早8:00 至晚9:00 对毕业生,学生可以根据自己的实 验安排进行实验。实验实施过程中,要求学生做好实验记录, 仔细观察实验现象,不懂的地方及时向老师咨询;并在每周五 下午5 点之前向指导教师汇报实验进展情况。 菌株分离纯化获得足够多的微生类和数量是有效筛选产油微生 物的前提。那么,从中高效分离纯化微生物显得非常 重要,但有同学不能有效地进行实施。就分离产油真菌而言, 透气性好、富含有机质的偏酸性土壤中真菌较多,而有的学生 却随意从校园一角采土样进行菌株分离,影响分离所得微生 类和数量;也有学生在分离过程中,选用的培养基中不添 加抗生素和孟加拉红,致使细菌、放线菌和真菌交织生长在一 起,不利于后续菌株纯化。此外,还有学生在筛选到菌株后,仅 从菌落形态方面简单判断后就将类似菌株丢弃,人为地降低 了所得微生物的丰度。 产油菌株筛选学生通过查阅文献不难发现产油微生物筛选常用的方 法是脂肪粒计数法。该方法是使用70%苏丹黑乙醇溶液将细 胞内的脂肪粒氧化成蓝黑色,细胞质经过%蕃红复染后成红 色,显微镜下统计脂肪粒数而进行初筛[4]。但有学生在实验前 精品文档 2016 全新精品资料-全新公文范文-全程指导写作 –独家原创 期没有筛选到产油微生物,了解得知学生初筛时间存在问题。初筛时间过早,会造成一些油脂积累缓慢的微生物漏筛,但菌 株培养时间过长也会造成产油优势菌株细胞内的脂肪粒重 叠而产生误差。 产油菌株鉴定当前微生物一般采用多相分类鉴定。为了毕业论文 质量,开阔学生视野,要求学生同时利用形态学观察与生理生 化特征等经典方法和现代生物学手段对所分离得到的 产油微生物进行分类鉴定。经典鉴定方法中,产油霉菌以形态 特征为主要指标,产油酵母则形态特征和生理生化指标兼用; 生物学方法采用通用引物ITS1 和ITS4 扩增其保守序列, 后扩增产物送上海生工生物工程有限公司进行纯化测序;测 序结果提交到 NCBIGenBank Blast,获得同源性较高菌株ITS序列,先利用ClustalX进行多重比对,再用构建NJ 系统进 化树,综合形态和生理生化特征,确定产油菌株的分类地位。 实践证明,经典鉴定方法繁琐耗时,而生物学方法简单便 捷,但实验技能要求较高,其关键步骤是高质量基因组制备和 PCR 扩增条件优化。微生物基因组质量好坏直接影响后续 PCR 扩增实验。虽然多数学生提取的基因组能够满足 PCR 扩增要求,但琼脂糖凝胶电泳的结果显示都存在不同程度的 弥散拖尾现象,表明制备的基因组有降解或含有 RNA、多糖 及蛋白质等杂质。那么,基因组 DNA 提取过程中应该注意哪 精品文档 2016 全新精品资料-全新公文范文-全程指导写作 –独家原创 些呢?一是在水浴保温期间,摇动不能太剧烈, 以防基因组 DNA 断裂;二是用等体积氯仿/异戊醇抽提时,上清液应无色, 且EP管中的有机相与水相交界处无明显的杂质,否则应重复 抽提。另外,还应在DNA 提取溶液中加入1μg/LRNase,以除 RNA,提高基因组质量。PCR扩增实验精微,需要格外细 心。如微量移液器的使用方法和 PCR 体系中各种药品的添 加顺序都会对实验结果产生重要影响,应及时对学生进行指 导。此外,退火温度是PCR 扩增实验关键反应条件之一。退 火温度过低会导致PCR 产物杂带过度,退火温度过高又扩增 不到目的片段。指导教师详细PCR 扩增实验原理之后, 学生掌握了PCR 扩增实验方法和注意事项。通过多次实验, 最终确定了所使用引物的退火温度,产油霉菌和产油酵母分 别为56和54。 结论经过论文选题、实验方案设计及实验实施等环节的教学 及指导,系统、科学地训练了学生的实验技能,锻炼了学生动 手能力、创新思维、综合分析和解决问题的能力,也培养了学 生的团队协作。以“产油微生物的分离与鉴定”为题,涉及 到微生物学、生物化学及生物学等学科理论知识和实验 技能,能够较为全面地多层次考察学生;而大多数学生能够在 有限的时间内较好地完成毕业论文,说明该论题难度适当,比 较适合作为本科毕业论文题目。此外,学生筛选到高产、稳定 精品文档 2016 全新精品资料-全新公文范文-全程指导写作 –独家原创 的优势产油菌株,可通过进一步定向遗传应用于工业生产,将会带来良好的经济效益,实现产学研的有机结合。